PEI轉(zhuǎn)染試劑其原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負電的磷酸基團形成帶正電的復(fù)合物后，再與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用，通過細胞胞吞進入細胞。該產(chǎn)品具有轉(zhuǎn)染效率高，細胞毒性低，操作簡單，重復(fù)性好，適用范圍廣等特點。
1、接種細胞：
對于貼壁細胞，轉(zhuǎn)染前18-24 h進行鋪板（不含抗生素），使其在轉(zhuǎn)染時的密度大約在80%左右。對于懸浮細胞，轉(zhuǎn)染當(dāng)天，配制EZ Trans-DNA復(fù)合物之前進行鋪板，每500 µL生長培養(yǎng)基中加入4~8×105cells。
2、準備EZ Trans-DNA復(fù)合物：
a、對于每孔細胞，將1 μg質(zhì)粒DNA稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基（或者OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基），混勻。
b、對于每孔細胞，將3 μL EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基（或者OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基），輕輕混勻。
注：無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基是稀釋液，不能使用含血清的培養(yǎng)基進行DNA和EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑的稀釋。因為EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物的形成過程不能含有血清。
c、將稀釋好的EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑盡快全部加入到已稀釋好的質(zhì)粒DNA中，輕輕混勻。
d、室溫放置10-15 min，以形成EZ Trans-DNA復(fù)合物。
3、轉(zhuǎn)染細胞：
a、將上述80 μL EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻滴入到含細胞的培養(yǎng)皿中。輕輕晃動培養(yǎng)皿或輕微振蕩，讓EZ Trans-DNA復(fù)合物分散均勻。
b、在37℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)6-18 h，去除含EZ Trans-DNA復(fù)合物的培養(yǎng)液，更換新的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)至對轉(zhuǎn)入基因表達分析。
